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細胞簡介：

大鼠尾動脈內皮分離自尾動脈組織；尾動脈是鼠尾的主要血管，尾部主要大血管分布表淺，尾側靜脈適于注射給藥，尾正中動脈適于動脈采血、練習顯微外科血管吻合技術等，實際應用相當普遍。許多動物模型也使用鼠尾。鼠尾部血管豐富，供血來源于薦中動脈和臀上動脈兩個動脈，形成尾椎節(jié)段性分布和縱向貫通分布相結合的特點，尾部淺層 3 套縱向動靜脈系統(tǒng)，鼠尾背側為不規(guī)則動靜脈鏈狀結構，深層血管與淺層血管雙層籠狀以每節(jié)脊椎為單位溝通，且呈動靜脈血管徑不匹配的特點。通過研究發(fā)現(xiàn)鼠尾存在兩套血源: 薦中動脈和臀上動脈。其在尾部依尾橫動脈形成溝通。尾橫動脈呈尾椎節(jié)段性分布，直接溝通尾正中動脈、尾深動脈和皮支。在尾部被橫斷后，可以保持損傷節(jié)段以上尾椎的動靜脈回流通路; 鼠尾存在動靜脈口徑明顯不規(guī)范的現(xiàn)象: 尾外側靜脈明顯大于伴隨的動脈，而正中動脈明顯大于伴隨的靜脈，形成供血主要來自腹面的尾正中動，回血主要依靠兩側的尾側靜脈，符合腹面動脈保護的安全性，同時利于血管散熱，尾橫動脈提供了不同血源體系的溝通渠道。參考文獻[王蕾，葉明霞.大鼠尾部血管的解剖結構與鼠尾的生理功能探討]。

方法簡介：

實驗室分離的大鼠尾動脈內皮采用-膠原酶聯(lián)合消化法結合差速貼壁法、并通過內皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測

實驗室分離的大鼠尾動脈內皮經CD31免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息：

包被條件：PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）

培養(yǎng)基：基礎培養(yǎng)基，含FBS、EGF、bFGF、IGF、VEGF、Heparin、Hydrocortisone、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細胞形態(tài)：內皮細胞樣

傳代特性：可傳1-2代

消化液：0.25%

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

大鼠尾動脈內皮體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織被消化；

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

公司正在出售的產品：

大鼠單核細胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)檢測試劑盒 ，英文名： MCP-1/CCL2/MCAF ELISA Kit

Porcine apolipoprotein A1 (apo-A1) ELISA Kit 豬載脂蛋白A1(apo-A1)檢測試劑盒

ELISA 小鼠凋亡誘導因子(mouse AIF)  進口分裝

CLIAKitforLPAb-IgG(HumanLegionellaaibodyIgG)ELISAKit人軍團菌抗體IgG

通用型DAB顯色溶液A液：10毫升B液：90毫升

ELISAKitIL-17雞白介素17

TNFSF11重組小鼠 RANKL / OPGL / TNFSF11 / CD254 蛋白 (Fc 標簽) Protein

表皮生長因子(EGF)重組蛋白 Recombinant Epidermal Growth Factor (EGF)

ARL2BP重組人 ARL2BP / BART1 蛋白 Protein

CD40LG Protein Human 重組人 CD40L / CD154 / TNFSF5 蛋白 (Fc 標簽)

IFNA8 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 Interferon alpha-B / IFNA8 蛋白

表皮生長因子(EGF)重組蛋白 Recombinant Epidermal Growth Factor (EGF)

CD40LG Protein Human 重組人 CD40L / CD154 / TNFSF5 蛋白 (Fc 標簽)

TNFSF11重組小鼠 RANKL / OPGL / TNFSF11 / CD254 蛋白 (Fc 標簽) Protein

IFNA8 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 Interferon alpha-B / IFNA8 蛋白

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小鼠血管生成素2(ANG-2)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human leukocyte aigen E (HLA-E) ELISA Kit 人類白細胞抗原E(HLA-E)檢測試劑盒

Humanpara-aminobenzoicacid,PABAELISAKit 人對(PABA)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

ACTH檢測試劑盒魚促腎上腺皮質激素規(guī)格：96T/48T

油脂DNA萃取試劑盒10次

MouseIerferonβ,IFN-β/IFNBELISAKit小鼠β干擾素(IFN-β/IFNB)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

大鼠尾動脈內皮細胞小鼠胰島素檢測試劑盒   小鼠胰島素試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠胰島素試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：檢測試劑盒（進口分裝），產品別名：小鼠胰島素試劑盒、小鼠胰島素檢測試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

小鼠檢測試劑盒   小鼠試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：檢測試劑盒（進口分裝），產品別名：小鼠試劑盒、小鼠檢測試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

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小鼠血小板因子檢測試劑盒   小鼠血小板因子試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠血小板因子試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：檢測試劑盒（進口分裝），產品別名：小鼠血小板因子試劑盒、小鼠血小板因子檢測試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

注意事項：

1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。

2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等，確保細胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導致細胞出現(xiàn)問題，責任由客戶自行承擔。

3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分細胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正常現(xiàn)象。觀察好細胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。

4. 貼壁細胞可以消化，懸浮細胞直接混勻收集細胞，900 rpm-1000 rpm離心3 min，棄上清。加5 mL PBS重懸細胞，再900 rpm-1000 rpm離心3 min，，用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。

6. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和我司技術部溝通交流。由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細胞僅供科研使用。

8. 備注：運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞，請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。收到細胞后次傳代建議1：2傳代 。

9.注意： 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。