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產(chǎn)品僅供研究使用，不適用于人類或臨床診斷
商品屬性：

產(chǎn)品英文名稱：Mouse IFN-γ protein, His Tag

產(chǎn)品中文名稱：重組小鼠干擾素-γ，His標簽（IFN-γ）

規(guī)格：20 μg/500 μg/100 μg

貨號：EY-01X8614
用途：僅供科研研究實驗

特點&優(yōu)勢:

分子:IFN-γ

標簽N-His

表達宿主:大腸桿菌

種屬:小鼠

序列:氨基酸序列來源于：鼠源 γ-IFN   (NP_P01580) (His23-Cys155)表達的蛋白片段，N端含有6xHis標簽。

活性:檢測其與配體的結(jié)合能力，檢測的實驗類型為功能性ELISA。1 μg/mL的包被小鼠IFN-γ蛋白(100 μl/孔)可與小鼠IFNGR1結(jié)合，小鼠IFNGR1的EC50為144ng/mL。

蛋白長度：重組小鼠 IFN-γ由154個氨基酸組成，預(yù)測的理論分子量為16.9 KDa，與SDS-PAGE結(jié)動?動

背景

干擾素（IFN）是一種廣譜抗病毒劑，并不直接殺傷或抑制病毒，而主要是通過細胞表面受體作用使細胞產(chǎn)生抗病毒蛋白，從而抑制乙肝病毒的復(fù)制，其類型分為三類，α-（白細胞）型、 β-（成纖維細胞）型，γ-（淋巴細胞）型；同時還可增強自然殺傷細胞（NK細胞）、巨噬細胞和T淋巴細胞的活力，從而起到免疫調(diào)節(jié)作用，并增強抗病毒能力。干擾素是一組具有多種功能的活性:蛋白質(zhì)（主要是糖蛋白），是一種由單核細胞和淋巴細胞產(chǎn)生的細胞因子。它們在同種細胞上具有廣譜的抗病毒、影響細胞生長，以及分化、調(diào)節(jié)免疫功能等多種生物活性:。

本產(chǎn)品具有下列特點:

 1.操作簡便、快捷?？芍苯蛹尤氲綑z測平板。在96-孔板中檢測時,無需洗滌或收獲細胞,免去溶解步驟。

2. 無放射性。不需要配制液閃混合物,也不需要處理廢棄物。

3. 與MTT相比,使用更安全。不需要使用揮發(fā)性的有機溶劑來溶解甲臜產(chǎn)物。

4. 操作靈活,與MTT不同,平板讀數(shù)后可放回溫箱繼續(xù)孵育,使顏色進一步生成。
公司正在出售的產(chǎn)品：

Apaf-1 (Apoptosis protease activating factor-1 0.5mgApaf-1 (Apoptosis protease activating factor-1)(CT) 凋亡蛋白活性因子-1(抗原)

EPHA4 Protein Human 重組人 EphA4 蛋白 (His & Fc 標簽)

FGFR1重組小鼠 FGFR1 / CD331 蛋白 (Fc 標簽)(Fc 標簽) Protein

DDR2 Protein Rat 重組大鼠 DDR2 Kinase / CD167b 蛋白 (Fc 標簽)

UBA1重組人 UBE1 / UBA1 蛋白 (His & GST 標簽) Protein

小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human neurokinin B (NKB) ELISA Kit 人神經(jīng)B(NKB)檢測試劑盒

HumanankyrinELISAKit 人錨蛋白(ankyrin)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humanai-hepatitisBviruscoreIgM,HBc-IgMaibody檢測試劑盒人抗乙型肝病毒核心IgM抗體(HBcAb-IgM)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物0酸烯醇式同酸羧化酶(PEPCase)活性酶耦聯(lián)比色法定量檢測試劑盒10次

Humanverylateappearingaigen4,VLA4ELISAKit人遲現(xiàn)抗原4(VLA4)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠白血病抑制因子受體檢測試劑盒   小鼠白血病抑制因子受體試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠白血病抑制因子受體試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：檢測試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠白血病抑制因子受體試劑盒、小鼠白血病抑制因子受體eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

小鼠高靈敏度促甲狀腺激素檢測試劑盒   小鼠高靈敏度促甲狀腺激素試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠高靈敏度促甲狀腺激素試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：檢測試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品動?動

大鼠白介素2可溶性受體α鏈(IL-2sRα/CD25)檢測試劑盒 ，英文名： IL-2sRα/CD25 ELISA Kit

Mouse ierleukin 6 (IL-6) ELISA Kit 小鼠白介素6(IL-6)檢測試劑盒

ELISA 小鼠類胰島素生長因子結(jié)合蛋白-1(mouse IGFBP-1)  進口分裝

CLIAKitforINH(HumanInhibin)ELISAKit人抑制素

通用型谷草酰乙酸轉(zhuǎn)氨酶(GOT)活性光譜法定量檢測試劑盒20次

ELISAKitHp-IgG大鼠幽門螺旋菌IgG

重組小鼠干擾素-γ，His標簽（IFN-γ）SERPINI1重組小鼠 SerpinI1 / Neuroserpin 蛋白 Protein

白介素31(IL31)重組蛋白 Recombinant Interleukin 31 (IL31)

CRIP2重組人 CRIP2 蛋白 Protein

EPHA4 Protein Human 重組人 EphA4 蛋白 (His & Fc 標簽)

IL1R1 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IL1R1 蛋白

操作步驟：

(一)獲得目的基因

1、通過PCR方法:以含目的基因的克隆質(zhì)粒為模板,按基因序列設(shè)計一對引物(在上游和下游引物分別引入不同的酶切位點),PCR循環(huán)獲得所需基因片段。

2、通過RT-PCR方法:用TRIzol法從細胞或組織中提取總RNA,以mRNA為模板,逆轉(zhuǎn)錄形成cDNA第一鏈,以逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為模板進行PCR循環(huán)獲得產(chǎn)物。

(二)構(gòu)建重組表達載體

1、載體酶切:將表達質(zhì)粒用限制性內(nèi)切酶(同引物的酶切位點)進行雙酶切,酶切產(chǎn)物行瓊脂糖電泳后,用膠回收Kit或凍融法回收載體大片段。

2、PCR產(chǎn)物雙酶切后回收,在T4DNA連接酶作用下連接入載體。

(三)  獲得含重組表達質(zhì)粒的表達菌種

1、 將連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH5α,根據(jù)重組載體的標志(抗Amp或藍白斑)作篩選,挑取單斑,堿裂解法小量抽提質(zhì)粒,雙酶切初步鑒定。

2、 測序驗證目的基因的插入方向及閱讀框架均正確,進入下步操作。否則應(yīng)篩選更多克隆,重復(fù)亞克隆或亞克隆至不同酶切位點。

3、 以此重組質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)化表達宿主菌的感受態(tài)細胞。

(四)誘導(dǎo)表達

1、挑取含重組質(zhì)粒的菌體單斑至2ml LB(含Amp50μg/ml)中37℃過夜培養(yǎng)。

2、按1∶50比例稀釋過夜菌,一般將1ml菌加入到含50mlLB培養(yǎng)基的300ml培養(yǎng)瓶中, 37℃震蕩培養(yǎng)至OD600≌0.4-1.0(*0.6,大約需3hr)。

3、取部分液體作為未誘導(dǎo)的對照組,余下的加入IPTG誘導(dǎo)劑至終濃度0.4mM作為實驗組,兩組繼續(xù)37℃震蕩培養(yǎng)3hr。

4、分別取菌體1ml, 離心12000g×30s收獲沉淀,用100μl 1%SDS重懸,混勻, 70℃10min。

5、離心12000g×1min,取上清作為樣品,可做SDS-PAGE等分析。