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原代細胞的分離與培養
點擊次數：1017 更新時間：2020-07-24
原代細胞是指來源活體組織，經過特定分離方法制備而成的初始細胞。
原代細胞離體時間短且不經過永生化過程，其生物學特性未發生很大變化，仍保持原有的遺傳特征，可更好地反映細胞在體內的生長狀態，從而獲得與體內生理功能更接近的數據，很適合用于藥物測試、細胞分化和轉化等實驗研究。
原代細胞是出了名的難養，對培養環境和實驗操作的要求更苛刻。細胞在體外通常只能傳代少數幾次，某些細胞（如神經元細胞）甚至無法進行傳代。對于研究人員來說，如何才能經濟高效地培養好細胞，并圍繞這有限幾次傳代的細胞設計實驗，是更大的一個挑戰。
原代細胞是取材于切除的動物組織，通過酶處理，在適當的條件下培養直至達到足夠的數量。分離的細胞有兩種類型：貼壁細胞（錨定依賴性生長）和懸浮細胞（錨定非依賴性），貼壁細胞多來自器官組織，而懸浮細胞多來自血液系統的細胞。
從組織制備細胞，即使捱過了極其嚴苛的解離步驟，不嚴謹的分離操作可能會導致細胞生長緩慢、表型不一致甚至細胞污染，特別是由于組織中可能含有細菌等微生物，污染問題對于細胞的分離和培養是一個很大的隱患。而為了讓研究人員不再為這些問題頭疼，現在已經出現了一些細胞公司可供應現成的細胞，并對應配有充分優化的培養基和實驗方案，這使得細胞的培養和研究比以往要輕松得多。
而對于具備自主從組織中獲取細胞的實驗室，也建議以商業化的細胞作為對照，采用均一性和穩定性更好的P2/P3代次進行實驗，并用專門的細胞培養基進行培養，zui大限度提高原代細胞的生長。
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